乳酸含量（lactic acid，LA）試劑盒說明書

分光光度法 50 管/24 樣

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

乳酸是生物體代謝過程中重要的中間產物，與糖代謝、脂類代謝、蛋白質代謝及細胞內能量代謝密切相關，乳酸含量是評估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標。

測定原理：

乳酸在乳酸脫氫酶的作用下生成丙酮酸，同時使 NAD⁺還原生成NADH 和H⁺，H⁺傳遞給PMS 生成的PMSH2 還原INT 生成紅色物質，在 530nm 處有特征吸收峰。

乳酸含量試劑盒   三羧酸循環系列-常備現貨

組成：

試劑三：粉劑×1 支，-20℃避光保存。臨用前加入 1.5ml 蒸餾水充分溶解。試劑四：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加 15ml 蒸餾水充分溶解。

顯色液：臨用前根據用量按照提取液（V）：試劑三（V）：試劑四（V）：試劑五（m）=1（ml)：0.3（ml)：3（ml)：15（mg）的比例充分混勻。（注意：現配現用，用多少配多少，在棕色瓶中配制，試劑盒中帶有5 個棕色空瓶）

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

自備儀器和用品：

天平、研缽、離心機、可見分光光度計、1 ml 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

樣本處理：

1. 組織：按照質量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加入 1ml 提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于 4℃，12000g 離心 10min，取上清測定。

2. 細胞：按照細胞數量（10⁴ 個）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1ml提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；于 4℃，12000g離心 10min，取上清測定。

3. 血清：直接測定。

注意：標準對照管和標準測定管只需測定一次，每個樣品測定管設一個樣品對照管

計算公式：

1. 按照蛋白含量計算

LA 含量（μmol/mg prot）=△A 樣÷△A 標×C 標÷ Cpr

=2×△A 樣÷△A 標÷ Cpr

2. 按照樣本質量計算

LA 含量（μmol/g 鮮重）=△A 樣÷△A 標×C 標÷ W

=2×△A 樣÷△A 標÷ W

3. 按照細胞數量計算

LA 含量（μmol/10⁴ cell）=△A 樣÷△A 標×C 標÷ 細胞數量

=2×△A 樣÷△A 標÷ 細胞數量

4. 按照液體體積計算

LA 含量（μmol/ml）=△A 樣÷△A標×C 標

=2×△A 樣÷△A 標

C 標：標準品濃度，2mmol/L ；W：樣本質量，g/ml；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/ml

注意事項：

1. 若吸光值超過 2，請進行適當的稀釋后再進行測定，并在計算公式中乘以稀釋倍數。

2. zui低檢出限為 1.8μmol/L。

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